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付彥秋　于樹軍　張乃勇
(長春市園林科學研究所)

摘　要：以矮牽牛種子為外植體，將其接種在MS+6��BA1mg/L+NAA0.03mg/L的培養基中進行培養，7～10天種子開始萌芽，15～20天新芽被誘導成愈傷組織，30天左右愈傷組織被誘導分化出叢生芽，再將叢生芽接種于MS+6��BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L的培養基中進行繼代培養出成苗，最后將成苗接種于1/2MS+NAA0.03mg/L培養基中，5～7天可生根，7～10天生根率可達100%。
　　關鍵詞：矮牽牛；組織培養；快速繁殖
　　矮牽牛（petunia hybrida vilm）又名“碧冬茄”、“靈芝牡丹”，為茄科多年生草本，通常作一年生栽培。原產南美，為矮牽牛（pviolacea）與腋花矮牽牛（p.axillaries）的雜種。矮牽牛花大，花色豐富，花期長，栽培管理省工，園林綠化上需求量大。但由于重瓣或大花品種常不易結實或實生苗不易保存母本的優良性狀，常采用扦插繁殖，但扦插繁殖速度太慢，滿足不了生產發展的需要，而組織培養可在短時期內獲得大量的優良種苗。為此，我們于2000～2001年開展了矮牽牛組培快繁的研究工作。
　　一、材料與方法
　　(一)材料
　　試驗所用材料為美國矮牽牛雜交一代新品種
　　(二)方法
　　1�辈牧系南�毒和接種
　　將矮牽牛種子用少量洗滌劑洗去表面灰塵，用蒸餾水沖洗干凈，放入70%酒精中消毒2分鐘，之后用無菌水沖洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒10分鐘，用無菌水沖冼4次備用，將消毒后的種子在無菌條件下接種于培養基中。
　　2�迸囵B基的篩選
　　本試驗采用的培養基為MS培養基，附加的植物生長調節物質為BA和NAA；蔗糖濃度為3%，卡拉膠濃度為0.4%，PH值為5.8。培養基篩選時，首先進行細胞分裂素（BA）濃度的篩選。
　　方法：
　　在添加0.03 mg/LNAA的培養基中添加不同濃度的BA。其濃度為0.1、0.5、1.0、和1.5 mg/L，培養30天后，根據培養物的生長狀況和增殖數量確定最佳的BA濃度。然后進行生長素（NAA）濃度的篩選，其方法為：在上述篩選出最佳BA濃度的培養基中添加不同濃度的NAA。其濃度為0.01、0.02、0.03和0.04 mg/L。根據培養物的生長狀況和增殖數量，確定最佳生長素濃度。
　　3�迸囵B條件
　　接種后的培養物放置在培養架上進行培養，出芽前需遮光，培養溫度控制在23±2℃。光強為1500～2000LX，每天光照14小時。
　　二、結果與分析
　　(一)芽的誘導
　　將滅菌的種子接種在MS+不同濃度的6��BA+NAA0.03 mg/L的培養基上，6��BA的濃度為0.1、0.5、1.0和1.5 mg/L，經10～30天，種子萌發，并誘導出愈傷組織，同時分化出許多叢生芽。結果表明，6��BA的濃度以1.0 mg/L為最佳。以同樣方法篩選NAA最佳濃度為0.03 mg/L。
　　(二)芽的增殖和生長
　　將分化出的叢生芽分別轉接到MS+6��BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L（處理1）、MS+6��BA0.3mg/L+NAA0.02 mg/L（處理2）、MS+6��BA0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L（處理3）、MS+6��BA0.5 mg/L（處理4）培養基上，20～30天繼代一次，從表1看出，在生長素濃度相同情況下，高濃度的6��BA提高了苗的繁殖系數，且苗的生長狀況也隨之發生變化，在不含生長素的培養基中，苗的生長受到影響。

表1 不同培養基對試管苗增殖和生長的影響（見園林科技信息）

表2不同濃度對試管苗生根的影響（調查時間為10天）（見園林科技信息）

　　當試管苗根長2～3cm時，可進行試管苗移栽，根據試驗，以珍珠巖為基質的幼苗移栽成活率為68%，而以沸騰爐渣為基質和以蛭石和珍珠巖（比例為2：1）為基質的幼苗成活率分別為92%和93%，這說明以沸騰爐渣、蛭石與珍珠巖混合為基質的均可。試管苗移栽后管理非常重要，要注意控制好溫度、濕度及光照，試管苗移栽后要搭塑料拱棚，光強時要適當遮蔭，每天早晚通風一次，一周后將塑料拱棚去掉，試管苗移栽20天后，可移栽到營養土中（上盆），一周后可移至室外。
　　三、結論
　　我們采用組織培養的方法快速繁殖矮牽牛獲得成功，并研究出適于矮牽牛快繁的培養基配方和試管苗快速繁殖技術。外植體的誘導及芽的誘導以MS附加6��BA1.0+NAA0.03mg/L效果最好，芽的分化比較理想的培養基是MS+6��BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L，根的誘導以1/2MS+NAA0.03mg/L效果最佳，根的誘導率為100%，試管苗移栽采用沸騰爐渣為基質以及蛭石和珍珠巖混合（2：1）為基質效果均較好。移栽成活率分別為92%和93%。

　　參考文獻：
［1］李瑛，鄭國慶.重瓣矮牽牛的組織培養.北方園藝，1993，2.